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pcr仪 南京精塞玛仪器 荧光pcr仪
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发布时间: 2022-09-30 13:23
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三磷酸脱氧核苷酸(dNTP)dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系。在PCR反应中,dNTP应为50-200μmol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等(等摩尔配制),浓度过低又会降低PCR产物的产量。5. 镁离子浓度Mg2 能与dNTP结合,荧光pcr仪,Mg2 对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响。在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为20μmol/L时,Mg2 浓度为1.5~2.0mmol/L为宜,Mg2 浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增:浓度过低,会降低taqDNA聚合酶的活性,使反应产物减少。


PCR仪的分类:

按扩增目的和检测标准来分,PCR仪有普通PCR仪,梯度PCR仪,PCR扩增仪,原位PCR,进口PCR仪,实时荧光定量PCR仪等几类。

其中,普通PCR仪一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度;梯度PCR仪可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度),单次扩增效率更高;原位PCR能够保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,更有利于探讨靶DNA与细胞之间的关系;实时荧光定量PCR仪是在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量功能的PCR仪器。您在选择PCR仪时,根据自己的检测需求、采购预算等因素选择合适的种类即可。




PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增量呈指数上升。反应终的DNA扩增量可用y=(1 X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数,X表示平均每次的扩增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为****,pcr仪,实际反应初期,靶序列DNA片段的增加呈指数形式,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DNA片段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,使平均效率达不到理论值


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