下面的步骤是PCR的反应原理，同时也是PCR仪的工作原理。

简单的说，定量pcr仪，就是通过高温变性，退火复性，延伸三个部分。

双链DNA在一定的环境中，通过在90-95℃变性，形成单链，然后退火降温到40-60℃，

在引物及其他辅助因子的作用下，使其初步结合，再快速升温至70-75℃，在相关酶的催化作用下，合成双链。完成一个扩增循环。

由此我们也可以得出PCR仪的一个主要参数：温度，温度示值是否准确，升温速率的快慢是影响其的一个主要因素。

具体要加什么缓冲液，要加什么引物，以及其他一些辅助因子，后续我们再去了解。

BioMark HD系统是将通量与敏感度集于一体的自动化基因分析平台，并将基因表达的研究深入到单细胞水平。与传统qPCR检测方法相比，BioMark HD系统仅需10 pg的起始实验材料，即可对群体或者单细胞进行表达谱分析，并且能在一张芯片上对多样本、多基因同时进行检测。多种规格的芯片能够满足从低到高的不同通量，pcr仪，适用于广泛的研究需求，而且样本和基因指标自由组合，用户弹性大。大量文献表明芯片内和芯片间的数据结果相关性高达0.99，具有优的重复性。

我们上面提到了反应的原理，由此我们可以简单的推断：温度作为变性-复性-延伸的基本设置，这个是我们需要校准的一个项目。

那么在反应的过程中，温度示值与设定值是否准确，我们需要知道。这是个温度示值误差；因为我们需要升温，降温，升温，这是不是涉及到一个速率的问题，升降温的快慢，会直接影响到整个反应过程，所以，升降温速率也是我们需要考量的一个方向。仪器通过加热模块去控制温度，在快速升降温的过程中，仪器不可避免的会先升高/降低温度之后，再达到所设定的问题，进口PCR仪，这就是温度的过冲，这也是可能也是一个考量的指标。达到一定的温度之后，实时荧光定量pcr仪，仪器要平衡一段时间（所设定的时间），而温度平衡的时间和设置的时间，是否一致，也是要考虑的一个方向。不同的DNA模板，需要的温度和解链的时间不一样，如果解链的时间没达到要求，DNA没有完全变性，在降温复性的过程中，会恢复到天然的状态。

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