在 real-time 技术的发展过程中，两个重要的发现起着关键的作用：（1）在90年代早期，pcr仪，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现，它能降解特异性荧光记探针，因此使得间接的检测PCR产物成为可能。
（2）此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。
这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致-PCR方法在研究工作中的运用。
常见的易致胎儿畸形的性疾病原体主要有单疱病毒（HSVⅡ）、病毒（RV）、人巨细胞病毒（HCMV）、弓形体（TOX）及衣原体（CT）。
以往这些病原体诊断比较困难，主要靠培养法进行确诊，而培养法费时，代价昂贵，而且受到采样、样本保存及用药等因素的影响，基本不能在临床中推广。
PCR基因扩增法因其高敏感性、高特异性非常适合这些疾病诊断及跟踪，是推荐的检验方法。
由于传统定量方法都是终点检测，即PCR到达平台期后进行检测，进口PCR仪，而PCR经过对数期扩增到达平台期时，检测重现性极差。
同一个模板在96孔PCR仪上做96次重复实验，所得结果有很大差异，因此无法直接从终点产物量推算出起始模板量。
加入内标后，可部分消除终产物定量所造成的不准确性。
但即使如此，传统的定量方法也都只能算作半定量、粗略定量的方法。
PCR扩增仪-精塞玛科学仪器-pcr仪由南京精塞玛科学仪器有限公司提供。
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