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发布时间: 2022-09-26 12:32
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尽管发病的机理尚未清楚,但相关基因发生突变是致癌性转变的根本原因已被广泛接受。癌基因的表达增加和突变,在许多早期就可以出现。实时荧光定量PCR不但能有效地检测到基因的突变,而且可以准确检测癌基因的表达量。目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性WT1基因、ER基因、癌PSM基因、相关的病毒基因等多种基因的表达检测。随着与相关的新基因的不断发现,荧光定量PCR技术将会在的研究中发挥更大的作用。


PCR技术的本质是体外核酸扩增,pcr仪报价,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2 和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复 “变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,小型pcr仪,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。

普通的PCR仪

一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,又叫传统的PCR仪。

用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。

(1)梯度PCR仪: 一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),实时荧光定量pcr仪,通常为12种温度梯度的普通PCR仪。

用途:研究未知DNA退火温度的扩增。

(2)原位PCR:将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析,在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。

用途:用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。




根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。1. 普通PCR仪一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。2. 梯度PCR仪一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的PCR仪称作梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其适退火温度是不同的,pcr仪,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的适退火温度,进行有效的扩增。用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。主要应用于科研、教学机构。


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