PCR技术的原理类似于DNA的天然过程，其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物，由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成 [2]  。1. 模板DNA的变性模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，PCR扩增仪，为下轮反应作准备。2. 模板DNA与引物的退火(复性)模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，pcr仪，引物与模板DNA单链互补序列配对结合。3. 引物的延伸DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留链。

当PCR循环阶段完成后，PCR扩增仪通常被设置为将样品“保持”在4℃，直到用户将其从仪器中取出。

将样品块冷却到这个温度，特别是长时间的冷却，会给样品块带来不必要的压力，并有可能使其寿命缩短10倍之多。为了避免这种情况，可以在程序结束后立即取出样品，或者将仪器设定为在室温下保持样品。

这对PCR产物的影响应该是小的，因为DNA在室温下是相对稳定的。此外，在低温下保持样品块，可能会导致冷凝水的积累。这不仅可能导致块状物本身的腐蚀，还可能损坏仪器内部的电气元件。

因此，当仪器不使用时，将PCR扩增仪的盖子打开，让任何积聚的冷凝水蒸发，是一个好的做法。

我们上面提到了反应的原理，由此我们可以简单的推断：温度作为变性-复性-延伸的基本设置，这个是我们需要校准的一个项目。

那么在反应的过程中，温度示值与设定值是否准确，我们需要知道。这是个温度示值误差；因为我们需要升温，降温，升温，这是不是涉及到一个速率的问题，升降温的快慢，会直接影响到整个反应过程，所以，升降温速率也是我们需要考量的一个方向。仪器通过加热模块去控制温度，在快速升降温的过程中，仪器不可避免的会先升高/降低温度之后，再达到所设定的问题，荧光pcr仪，这就是温度的过冲，这也是可能也是一个考量的指标。达到一定的温度之后，仪器要平衡一段时间（所设定的时间），而温度平衡的时间和设置的时间，是否一致，也是要考虑的一个方向。不同的DNA模板，需要的温度和解链的时间不一样，如果解链的时间没达到要求，DNA没有完全变性，在降温复性的过程中，会恢复到天然的状态。

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